KỸ THUẬT ELISA TRONG CHĂN NUÔI THÚ Y

  • 12/07/2024
  • ELISA là gì?

    ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) là một kỹ thuật được sử dụng để phát hiện sự hiện diện của một kháng thể hoặc kháng nguyên trong các mẫu sinh học bằng phản ứng miễn dịch đặc hiệu.

    Mẫu dùng cho ELISA: huyết thanh, huyết tương, nước tiểu, dịch ly giải tế bào, dịch ly giải mô, nước bọt.

    Nguyên tắc chung

    Kỹ thuật ELISA dựa trên sự tương tác đặc hiệu giữa kháng nguyên (KN) và kháng thể (KT) phát hiện bằng kháng thể đánh dấu. Khi cho thêm cơ chất thích hợp (thường là nitrophenol phosphate) vào phản ứng, enzyme sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu.

    Các bước thực hiện kỹ thuật ELISA

    Những lưu ý khi thực hiện phản ứng ELISA

    Chuẩn bị:

    - Mang bộ kít từ tủ mát ra để ở nhiệt độ phòng 30 phút trước khi thực hiện

    - Các ống eppendorf (huyết thanh) spin down nhẹ

    Thao tác:

    - Cho mẫu theo thứ tự đánh dấu ghi trên Bảng ELISA Test

    - Khi cho diluent sample, trộn đều ít nhất 5 lần, không chạm đáy giếng

    - Bước rửa không để đầu típ chạm dịch

    - Hóa chất trước khi thêm vào đĩa phải lắc đều

    - Cơ chất thêm vào đảm bảo giữ ở điều kiện tối

    - Sau khi cho stop solution, đọc kết quả trong vòng 5 phút

    - Khởi động máy đọc ELISA trước khi đọc kết quả ít nhất 5 phút

    Kết quả:

    Lưu file đã đọc trong máy theo thứ tự: Tên kít Hãng sản xuất ngày tháng năm. Ví dụ: PRRSVAB_Mien_20240712

    Xử lý kết quả đọc trên excel, so sánh với màu của dung dịch để xem sự tương quan.

    Phân tích kết quả xét nghiệm ELISA

    1. Kết quả dương tính (đã loại bỏ dương tính giả)

     Trong kỹ thuật ELISA, kết quả dương tính nghĩa là thú đã tiếp xúc với KN(đã lâu hoặc mới đây), do tiêm phòng hoặc cũng có thể do kháng thể mẹ truyền. Như vậy, dương tính không có nghĩa là đàn thú đang bị bệnh, do đó cần có thông tin về dịch tễ, quy trình chăn nuôi để đi đến kết luận cuối cùng.

    2. Kết quả âm tính (đã loại bỏ âm tính giả)

    Kết quả âm tính đưa ra nhiều giả thuyết như:

    - Đàn thú chưa từng tiếp xúc với KN

    - Đàn thú mới tiếp xúc với mầm bệnh gần đây (trong 5 ngày đầu sau khi gặp KN, cơ thể chưa có kháng thể)

    - Đàn thú đã tiếp xúc KN quá lâu, và là loại KN có độ bảo hộ ngắn nên KT đã hết (IgM: mau hủy; IgG: lâu hủy)

    Ứng dụng của ELISA

    Khi nào phân tích ELISA tìm KN?

    1. Kiểm tra sự lưu hành của virus/vi khuẩn, trực tiếp thông qua protein kháng nguyên trong mẫu

    2. Khi thú mới nhiễm bệnh, chưa có kháng thể

    3. Kiểm tra độc tố vi khuẩn

    Khi nào phân tích ELISA tìm KT?

    1. Kiểm tra đáp ứng miễn dịch sau tiêm phòng (PPV, PRRSV, PCV2, Giả dại, APP, HPS, Mycoplasma, E.coli, CSFV…)

    2. Kiểm tra heo con nhận kháng thể qua sữa đầu

    3. Kiểm tra sự lưu hành của virus/vi khuẩn, gián tiếp thông qua kháng thể

    Không thể phủ nhận vai trò của kỹ thuật ELISA trong chăn nuôi thú y hiện nay. Khi quy mô và mật độ chăn nuôi ngày càng tăng, hoạt động tầm soát – giám sát các tác nhân gây bệnh càng cần được quan tâm.

                                                                                                                                                                   R.E.P Biotech

    Thông tin chuyên môn trong bài có tham khảo từ bài giảng "Chẩn đoán phòng thí nghiệm" của TS. BSTY. Đinh Xuân Phát

    ---------------------------------------

    TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU - PHÂN TÍCH - XÉT NGHIỆM - TẦM SOÁT R.E.P

    - 𝑵𝙝𝒂𝙣𝒉 𝒄𝙝𝒐́𝙣𝒈 - 𝑲𝙞̣𝒑 𝒕𝙝𝒐̛̀𝙞 - 𝙆𝒉𝙖́𝒄𝙝 𝙦𝒖𝙖𝒏 - 𝑩𝙖̉𝒐 𝒎𝙖̣̂𝒕 -

    🏭 KCN Nhơn Trạch 3, đường Nguyễn Ái Quốc, TT. Hiệp Phước, Đồng Nai

    📧 info@repbiotech.com

    ☎ 0327 615 454

    Bài viết liên quan

    • VẮC-XIN TRONG CHĂN NUÔI THÚ Y

      Từ lâu vắc-xin đã đóng vai trò quan trọng trong ngành chăn nuôi thú y bởi ý nghĩa chủ động ngăn ngừa các bệnh do vi sinh vật gây ra, bảo vệ sức khỏe đàn vật nuôi. Do đó, việc hiểu để sử dụng đúng, phát huy hết tác dụng của vắc-xin là điều cần thiết.

    • KIỂM SOÁT TỐT BỆNH MAREK – LOẠI BỎ KẺ THÙ NGUY HIỂM

      Bệnh Marek được biết đến từ lâu trong ngành chăn nuôi gà bởi những ảnh hưởng nặng nề mà bệnh này gây ra trên đàn gà. Khi đàn gà bắt đầu biểu hiện những triệu chứng của bệnh, thiệt hại là điều chắc chắn. Do đó nhà chăn nuôi cần kiểm soát tốt bệnh Marek – Loại bỏ kẻ thù nguy hiểm này khỏi trang trại.

    • ĐÁNH GIÁ BẢO HỘ VẮC-XIN IB GIỮA ĐA DẠNG CÁC BIẾN CHỦNG

      Bệnh viêm phế quản truyền nhiễm ở gà (Infectious bronchitis viết tắt là: IB) là bệnh hô hấp cấp tính, có tính truyền lây cao ở gà.

    • TEMBUSU - GIẢI PHÁP XÉT NGHIỆM TỪ R.E.P LABS GIÚP GIẢM THIỆT HẠI CHO NGƯỜI CHĂN NUÔI

      Bệnh do Tembusu virus đã được xác định ở nhiều nơi trên địa bàn các tỉnh của Việt Nam. Bệnh gây ra hội chứng lật ngửa, giảm đẻ trên đàn thủy cầm. Bệnh có thể là nguyên nhân gây tỷ lệ chết lên đến 70-80% tổng đàn, gây ra thiệt hại rất lớn đến hiệu quả chăn nuôi.

    • XU HƯỚNG CHĂN NUÔI CÓ TẦM SOÁT DỊCH BỆNH

      Để hạn chế dịch bệnh lây lan thì tầm soát dịch bệnh là việc làm rất cần thiết đối với các chủ trang trại. Nhằm giúp Khách hàng an tâm hơn trong quá trình chăn nuôi, cùng với việc hỗ trợ Khách hàng xét nghiệm mẫu nước, cám hoặc mẫu bệnh phẩm để tầm soát dịch bệnh, phát hiện sớm dịch bệnh, hạn chế lây lan giảm tỷ lệ chết trên đàn vật nuôi, giúp Khách hàng giải quyết những khó khăn trong quá trình chăn nuôi.